Xác định tác nhân lây nhiễm bệnh Translucent Postlarvae Disease - TPD ở tôm thẻ chân trắng

  • Thứ tư, 14/07/2021, 16:10 GMT+7
  • Lượt xem: 95

TỔNG QUAN

Nuôi trồng thủy sản, bao gồm cả nuôi tôm, là ngành sản xuất thực phẩm từ động vật phát triển nhanh nhất trên thế giới. Một số bệnh mới nổi - bao gồm bệnh hoại tử gan tụy cấp tính (AHPND), bệnh chết bí ẩn do vi rút (VCMD), nhiễm vi bào tử trùng (EHP) và bệnh do SHIV - đã ảnh hưởng đến ngành nuôi tôm toàn cầu. Gần đây, một loại bệnh mới được gọi là “mờ thân hậu ấu trùng” (TPD) hoặc “bệnh hậu ấu trùng thủy tinh” (GPD) (sau đây gọi tắt là bệnh thân thủy tinh - TPD) ở tôm thẻ chân trắng Thái Bình Dương ( Litopenaeus vannamei ) đã trở thành mối đe dọa ngày càng tăng nhanh đối với nghề nuôi tôm ở Trung Quốc gần đây.

Kể từ tháng 3 năm 2020, nhiều trường hợp nhiễm thân thủy tinh đã xảy ra ở một số loài tôm thẻ chân trắng trong các trại sản xuất giống ở các tỉnh Quảng Đông và Quảng Tây, sau đó bệnh mới này bắt đầu lây lan sang các vùng nuôi tôm chính ở phía bắc Trung Quốc thông qua việc vận chuyển tôm giống vào tháng 4 năm 2020. Bệnh thân thủy tinh chủ yếu ảnh hưởng đến tôm giống ở độ tuổi từ 4 đến 7 ngày tuổi (PL4 đến PL7) với khả năng lây nhiễm rất nặng. Thông thường, tỷ lệ mắc bệnh của một quần thể bị bệnh có thể lên đến 60% vào ngày thứ hai sau lần đầu tiên quan sát thấy những cá thể bất thường, và thậm chí lên đến 90-100% trong những trường hợp nghiêm trọng vào ngày thứ ba. Tôm bị bệnh thân thủy tinh chủ yếu có các dấu hiệu lâm sàng giống nhau, chẳng hạn như gan tụy nhợt nhạt hoặc không màu và đường tiêu hóa trống rỗng, làm cho cơ thể của các cá thể bị bệnh trở nên trong suốt và mờ.

Bệnh thân thủy tinh đã trở nên phổ biến trong đàn tôm nuôi, dẫn đến thiệt hại nghiêm trọng về kinh tế ở một số vùng nuôi tôm ở Trung Quốc, vì vậy việc điều tra và xây dựng chiến lược phòng chống dịch bệnh là cấp thiết. Nhóm nghiên cứu đã lấy mẫu tôm bị ảnh hưởng bởi TPD và sàng lọc một số mầm bệnh đã biết của tôm, nhưng kết quả của chỉ ra rằng những con tôm này không có mầm bệnh vi-rút đã biết và cho rằng bệnh thân thủy tinh có thể do một mầm bệnh mới xuất hiện gây ra. Ngoài ra, một số nông dân nhận thấy rằng việc xử lý nước trong bể nuôi bằng chất kháng khuẩn có thể làm giảm bệnh, cho thấy bệnh thân thủy tinh có thể do một mầm bệnh vi khuẩn gây ra.

THIẾT LẬP NGHIÊN CỨU

Những con tôm thẻ chân trắng L. vannamei bị bệnh (PL7, chiều dài cơ thể từ 6 đến 8 mm) được lấy mẫu từ một trang trại nuôi tôm ở Ganyu, tỉnh Giang Tô, Trung Quốc. Những con này đã được xử lý để kiểm tra mô bệnh học và để quan sát bằng kính hiển vi điện tử truyền qua. Tôm post PL3 ​​khỏe mạnh, chiều dài cơ thể từ 4 đến 6 mm) được mua từ một trang trại nuôi tôm ở Duy Phường, tỉnh Sơn Đông, và nuôi trong hai ngày, sau đó được sử dụng cho thí nghiệm.

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

AHPND xảy ra khoảng 35 ngày sau khi thả tôm vào ao nuôi, và sự khởi đầu của các dấu hiệu lâm sàng và tỷ lệ chết của AHPND bắt đầu sớm nhất là 10 ngày sau khi thả nuôi trong một số trường hợp nghiêm trọng. Nhưng TPD thường xảy ra trong PL4-7, sớm hơn nhiều so với khi AHPND thường xuất hiện. Do đó, chúng tôi suy luận rằng TPD là một bệnh mới khác với AHPND.

Kết quả của các xét nghiệm phân tử cho thấy các cá thể bị bệnh trong các bể ương nuôi hậu ấu trùng bị ảnh hưởng bởi TPD đều âm tính với các bệnh chính của tôm nuôi, bao gồm hội chứng đốm trắng (WSSV), hoại tử cơ quan tạo máu (IHHNV), AHPND, vi bào tử trùng (EHP), virus gây bệnh SHIV, virus đầu vàng (YHV), virus gây hội chứng Taura (TSV) và virus gây bệnh hoại tử cơ (IMNV).

TTT__
Hình 1: Các phần mô học của hậu ấu trùng bị nhiễm bệnh tự nhiên trong các bể nuôi tôm L. vannamei post bị TPD. (a, b) Giai đoạn đầu với sự phá hủy đáng kể của gan tụy. Lưu ý sự hoại tử nhẹ của các tế bào biểu mô (EC) của ống gan tụy (HP), đặc biệt là EC trong các ô chấm có biểu hiện nhân đặc trưng sẫm màu, nhỏ hơn và đặc trưng. Sự xâm nhập của vi khuẩn (BC) trong giai đoạn đầu của quá trình lây nhiễm đã được chỉ ra bởi các mũi tên màu đen. Các EC có mũi tên (mũi tên đen) là tế bào B với không bào lớn. (c, d) Giai đoạn cấp tính với sự xâm nhập lớn của vi khuẩn. Có rất nhiều vi khuẩn xâm nhập vào các ống gan tụy ở một nửa số cơ quan, nơi các khối vi khuẩn và các ống này bị tiêu diệt. Lưu ý sự tách rời / bong tróc của EC gan tụy (mũi tên màu trắng). (e, f) Phần giữa đường tiêu hóa bị ảnh hưởng của hậu ấu trùng bị nhiễm bệnh tự nhiên có biểu hiện hoại tử (hộp có chấm) và bong tróc (mũi tên trắng) các EC của đường tiêu hóa. Lưu ý khối lượng BC trong lumen ống của đường tiêu hóa ở giai đoạn giữa. (b), (b1), (d), và (e) lần lượt là ảnh hiển vi được phóng đại của vùng trong khung đen ở (a – c) và (e0). (a, b, e) cho thấy sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng. (c, d, f) thể hiện sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn nhiễm trùng cấp tính. Các vạch chia độ = (a) 100 μm, (b) 20 μm, (c) 100 μm, (d) 20 μm, (e0) 100 μm, (e) 10 μm và (f) 5 μm. e) cho thấy sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng. (c, d, f) thể hiện sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn nhiễm trùng cấp tính. Các vạch chia độ = (a) 100 μm, (b) 20 μm, (c) 100 μm, (d) 20 μm, (e0) 100 μm, (e) 10 μm và (f) 5 μm. e) cho thấy sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng. (c, d, f) thể hiện sự thay đổi bệnh lý trong giai đoạn nhiễm trùng cấp tính. Các vạch chia độ = (a) 100 μm, (b) 20 μm, (c) 100 μm, (d) 20 μm, (e0) 100 μm, (e) 10 μm và (f) 5 μm.

Do đó, xét thấy việc xử lý nước trong bể ương tôm post bằng chất kháng khuẩn có thể làm giảm bệnh, trước tiên, chúng tôi tiến hành phân lập và xác định mầm bệnh vi khuẩn từ các mẫu L. vannamei bị bệnh thân thủy tinh. Vi khuẩn ưu thế phân lập từ tôm bị nhiễm bệnh nặng được xác định là V. parahaemolyticus theo nhiều xét nghiệm khác nhau.

Và phân tích khả năng gây bệnh của những V. parahaemolyticus này trong một nghiệm thức chỉ ra rằng các dấu hiệu lâm sàng tổng thể điển hình tương tự như ở tôm nuôi bị thân thủy tinh. Sự khởi phát và tiến triển của bệnh trong nghiệm thức cũng như tỷ lệ chết cũng tương tự như ở tôm nuôi bị thân thủy tinh. Do đó, loài V. parahaemolyticus mới này ( Vp -JS20200428004-2) được suy luận là tác nhân gây bệnh thân thủy tinh ở tôm post.

TTT_3
Hình 2: Tỷ lệ chết tích lũy của tôm thẻ chân trắng gây ra do ngâm trong nồng độ gradient của vi khuẩn Vp-JS20200428004-2. Bốn nhóm tôm khỏe mạnh được ngâm trong nồng độ pha loãng 1,83 × 107 ~ 1,83 × 104 CFU / mL (nhóm bị nhiễm bệnh), và một nhóm được ngâm trong nước biển đun sôi (nhóm đối chứng). Tỷ lệ chết tích lũy của tôm được thể hiện hai lần lặp lại cho mỗi nhóm thí nghiệm.

Dựa trên kết quả của nghiên cứu, các dấu hiệu mô bệnh học tổng thể của thân thủy tinh không giống với dấu hiệu của AHPND và cũng khác với dấu hiệu do V. parahaemolyticus không điển hình gây ra. Để khám phá thêm về cơ chế gây bệnh của Vp -JS20200428004-2, các nghiên cứu so sánh có hệ thống hơn nên được thiết kế và tiến hành; thông tin chi tiết về các gen chức năng, plasmid và bộ gen của Vp -JS20200428004-2 cần được nghiên cứu thêm trong tương lai.

Cho đến nay, bệnh Vibriosis, do nhiều loại Vibrio spp., đã được báo cáo xảy ra ở các giai đoạn phát triển khác nhau của L. vannamei , bao gồm nauplius (2 ngày), zoea (4 đến 5 ngày), mysis (3 đến 5 ngày), hậu ấu trùng (10 đến 15 ngày) và con non. Vibrio alginolyticus có liên quan đến hội chứng zoea 2 và hội chứng nấm mốc mysis ở giai đoạn ấu trùng, trong khi V. alginolyticusV. harveyi có liên quan đến hội chứng bolitas.

Loại thứ hai đề cập đến hội chứng ấu trùng ở L. vannamei liên quan đến sự tách rời của các tế bào biểu mô khỏi ruột và gan tụy, chúng xuất hiện như những quả cầu nhỏ trong đường tiêu hóa. Rõ ràng, hội chứng mô bệnh học của ruột và gan tụy của bệnh thân thủy tinh do Vp -JS20200428004-2 gây ra khác với hội chứng bolitas. Ngoài ra, các dấu hiệu lâm sàng của thân thủy tinh khác với các dấu hiệu lâm sàng của hội chứng bolitas, bao gồm giảm ăn, chậm phát triển, bơi chậm và giảm bài tiết. Vì vậy, dựa trên kết quả của nghiên cứu, có thể xác định thân thủy tinh là một bệnh Vibrio mới xảy ra ở giai đoạn PL của L. vannamei .

QUAN ĐIỂM

Dựa trên kết quả phân tích hệ thống bao gồm phân lập, xác định và xét nghiệm tác nhân gây bệnh theo bốn tiêu chí được thiết kế để thiết lập mối quan hệ gây bệnh giữa vi khuẩn và bệnh tật, có thể xác nhận rằng một loài V. parahaemolyticus mới (Vp -JS20200428004-2) là tác nhân gây bệnh liên quan đến bệnh thân thủy tinh mới nổi ảnh hưởng đến việc nuôi tôm ở Trung Quốc vào năm 2020.

Tác nhân gây bệnh mới cho thấy độc lực cao đối với tôm giống và có thể gây ra những thay đổi cấp tính và nghiêm trọng về mô bệnh học ở gan tụy và đường tiêu hóa. Nguy cơ dịch bệnh và thiệt hại về PL do mầm bệnh mới này gây ra cần được quan tâm hơn nữa.

Bài viết này được lược dịch từ ấn phẩm gốc của Zou, Y. và cộng sự, năm 2020- Xác định Tác nhân Truyền nhiễm Bệnh Thân Thủy Tinh (TPD) ở Penaeus vannamei

Ý kiến bạn đọc